論文摘要：了解上海市雞源大腸桿菌耐藥情況及耐藥規(guī)律。以滅菌棉簽拭采雞肛（泄殖腔）和拭子蘸取新鮮糞便，分別對(duì)上海地區(qū)3個(gè)雞場(chǎng)進(jìn)行采樣，按照常規(guī)法分離培養(yǎng)細(xì)菌，應(yīng)用API20E試紙條進(jìn)行細(xì)菌鑒定，采用微量肉湯稀釋法測(cè)定了大腸桿菌對(duì)13種抗菌藥物耐藥情況。對(duì)172株大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的結(jié)果顯示，其中耐藥率在90％以上的有恩諾沙星（96.5％）、四環(huán)素（94.8％）、氨芐西林（94.2％）、慶大霉素（93.6％）、復(fù)方新諾明（91.3％）；80％以上的有阿米卡星（85.5％）、阿莫西林（82.0％）、氟苯尼考（80.2％）；70％以上的磺胺異噁唑（75.0％）、氧氟沙星（73.8％）；50％以的有頭孢唑啉（52.3％）；40％以的有頭孢噻呋（41.9％），而對(duì)粘桿菌素幾乎全部敏感（99.4％）。上述3個(gè)雞場(chǎng)分離的大腸桿菌株耐藥性嚴(yán)重，耐藥譜復(fù)雜，多重耐藥性、交叉耐藥性嚴(yán)重。
論文關(guān)鍵詞：雞,大腸桿菌,耐藥性
　　抗菌藥物在畜禽養(yǎng)殖上的應(yīng)用，無(wú)論對(duì)治療和預(yù)防動(dòng)物疫病、促進(jìn)生長(zhǎng)，還是提高畜牧業(yè)生產(chǎn)效能方面都起到了積極的作用。但是，隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌耐藥性變得越來(lái)越嚴(yán)重。動(dòng)物源性耐藥菌株的存在，直接使抗菌藥物療效降低，病程延長(zhǎng)，導(dǎo)致患病動(dòng)物死亡率升高，帶來(lái)經(jīng)濟(jì)損失；也可以直接或間接地進(jìn)入食物鏈傳播給人，造成難以控制的感染，更可能通過(guò)動(dòng)物與動(dòng)物之間、人與動(dòng)物之間耐藥基因的傳遞而構(gòu)成潛在危害。同時(shí)，耐藥性問(wèn)題的加劇，迫使養(yǎng)殖行業(yè)不得不加大抗菌藥物使用劑量、頻次和范圍，不僅造成耐藥性的惡性循環(huán)，更引入了藥物殘留的問(wèn)題。因此，加強(qiáng)抗菌藥物的耐藥性監(jiān)測(cè)工作，合理用藥，及早采取措施干預(yù)及控制細(xì)菌耐藥性擴(kuò)展是十分有必要的。一般情況下，大腸桿菌作為條件性致病菌和常在菌往往顯示出細(xì)菌的耐藥狀況。為此，選擇上海地區(qū)3個(gè)雞場(chǎng)對(duì)大腸桿菌的耐藥性進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。
　　1材料與方法
　　1.1實(shí)驗(yàn)細(xì)菌菌株與材料
　　質(zhì)控菌株：大腸桿菌，ATCC25922，中國(guó)獸醫(yī)微生物菌種保藏中心，；飼養(yǎng)場(chǎng)分離菌株，大腸桿菌172株，由上海市獸藥飼料檢測(cè)所生物測(cè)定室2009年分離自上海3個(gè)雞飼養(yǎng)場(chǎng)；營(yíng)養(yǎng)瓊脂、營(yíng)養(yǎng)肉湯、麥康凱瓊脂和Mueller-Hinton肉湯，OXIOD公司；API20E試紙，BIOMERIEUX公司；凍干型腸道菌定量藥敏（MIC）檢測(cè)板，中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供。
　　1.2實(shí)驗(yàn)方法
　　1.2.1樣本采集
　　以滅菌棉簽拭采雞肛（泄殖腔）和拭子蘸取新鮮糞便，分別對(duì)上海地區(qū)3個(gè)雞場(chǎng)進(jìn)行采樣，在采樣同時(shí)，詢(xún)問(wèn)飼養(yǎng)場(chǎng)的生產(chǎn)管理情況、疫病發(fā)生情況及抗菌藥物使用情況（包括治療用藥及抗菌促生長(zhǎng)劑）。
　　1.2.2細(xì)菌分離與鑒定
　　按常規(guī)方法接種于麥康凱瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h，觀察菌落生長(zhǎng)情況。挑取粉紅色、邊緣光滑的大腸桿菌可疑菌落，用麥康凱培養(yǎng)基純化一代后接種魚(yú)營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h，以API20E鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。
　　1.2.3藥敏試驗(yàn)與結(jié)果判定
　　藥敏試驗(yàn)采用凍干型腸道菌定量藥敏（MIC）檢測(cè)板使用說(shuō)明進(jìn)行操作，結(jié)果判定及質(zhì)量控制按照農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《腸道菌和金葡菌抗菌藥敏感試驗(yàn)規(guī)程草案和判斷標(biāo)準(zhǔn)》和國(guó)際公認(rèn)的《臨床和實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)》（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。
　　2結(jié)果與分析
　　2.1細(xì)菌分離情況
　　從3個(gè)雞場(chǎng)中共采集樣品180份，分離鑒定得到172株大腸[2]桿菌，分離率為95.6%。三個(gè)雞場(chǎng)所占比率分別為95.0%、95.0%、96.7%。結(jié)果見(jiàn)表1。
　　表13個(gè)雞場(chǎng)大腸桿菌分離情況
　　

雞場(chǎng)大腸桿菌 雞場(chǎng)1 雞場(chǎng)2 雞場(chǎng)3

采樣數(shù) 60 60 60 分離數(shù) 59 58 59 鑒定數(shù) 57 57 58 分離率（%） 95.0 95.0 96.7

　　2.2分離菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果
　　雞大腸桿菌對(duì)13種抗菌藥物進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，其中耐藥率在90％以上的有恩諾沙星（96.5％）、四環(huán)素（94.8％）、氨芐西林（94.2％）、慶大霉素（93.6％）、復(fù)方新諾明（91.3％）；80％以上的有阿米卡星（85.5％）、阿莫西林（82.0％）、氟苯尼考（80.2％）；70％以上的磺胺異噁唑（75.0％）、氧氟沙星（73.8％）；50％以的有頭孢唑啉（52.3％）；40％以的有頭孢噻呋（41.9％），而對(duì)粘桿菌素幾乎全部敏感（99.4％），試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)2。試驗(yàn)結(jié)果表明上述3個(gè)雞場(chǎng)對(duì)所檢測(cè)的抗菌藥物均產(chǎn)生不同程度的耐藥性，且耐藥性嚴(yán)重。
　　表2雞大腸桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果
　　

抗菌藥耐藥(R) 中介(I) 敏感(S) 菌株數(shù)比例(%) 菌株數(shù)比例(%) 菌株數(shù)比例(%)

氧氟沙星 127 73.8 29 16.9 16 9.3 恩諾沙星 166 96.5 6 3.5 0 0 四環(huán)素 163 94.8 9 5.2 0 0 慶大霉素 161 93.6 9 5.2 2 1.2 阿米卡星 147 85.5 13 7.6 12 7.0 氨芐西林 162 94.2 8 4.7 2 1.2 頭孢噻呋 72 41.9 19 11.0 81 47.1 頭孢唑啉 90 52.3 4 2.3 78 45.3 磺胺異噁唑 129 75.0 4 2.3 39 22.7 氟苯尼考 138 80.2 8 4.7 26 15.1 復(fù)方新諾明 157 91.3 1 0.6 14 8.1 阿莫西林 141 82.0 0 0 31 18.0 粘桿菌素 1 0.6 0 0 171 99.4

　　2.3不同雞場(chǎng)大腸桿菌耐藥性比較
　　3個(gè)雞場(chǎng)分別對(duì)13中抗菌藥物耐藥性的比較情況見(jiàn)圖2。由圖2可知，3個(gè)雞場(chǎng)大腸桿菌對(duì)氧氟沙星、恩諾沙星、四環(huán)素、慶大霉素、復(fù)方新諾明及氨芐西林的耐藥率較為一致，均為嚴(yán)重；雞場(chǎng)2與雞場(chǎng)1和雞場(chǎng)3比較，對(duì)阿莫西林、阿米卡星、磺胺異噁唑、頭孢噻呋及頭孢唑啉的耐藥率低，但雞場(chǎng)2大腸桿菌對(duì)阿莫西林（66.7%）、阿米卡星（69.8%）及磺胺異噁唑（71.6%）的耐藥率仍較高；對(duì)粘桿菌素幾乎全部敏感。
　　圖1不同雞場(chǎng)大腸桿菌耐藥性比較
　　2.4雞大腸桿菌耐藥譜
　　受檢的172株大腸桿菌對(duì)13種抗菌藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，最少的有3耐，多數(shù)為7耐以上的菌株。有16株（9.3%）為3耐；有32株（18.6%）為4～7耐；有123（71.5%）株為8～12耐；有1株為13耐（0.6%）。其中9耐菌株46株，所占比例最大（26.7%）；其次為10耐、11耐（分別占16.1%、10.0%），結(jié)果見(jiàn)圖2。
　　
　　圖2雞大腸桿菌多重耐藥性
　　3討論
　　3.1關(guān)于藥敏試驗(yàn)和耐藥譜
　　試驗(yàn)結(jié)果顯示，所分離的172株雞源大腸桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性以多重耐藥為主，耐藥性較高的抗菌藥主要是獸醫(yī)臨床使用頻率較高的藥物。這與雞場(chǎng)由于疾病壓力而大量使用抗菌藥物或規(guī)模化雞場(chǎng)飼料中長(zhǎng)期添加抗生素或促生長(zhǎng)劑，細(xì)菌的耐藥性通過(guò)染色體或耐藥質(zhì)粒在細(xì)菌間傳播和擴(kuò)散有關(guān)。另外，應(yīng)引起重視的是：第3代頭孢菌素類(lèi)（頭孢唑啉，頭孢噻呋）的耐藥率也漸強(qiáng)；阿米卡星雖在獸醫(yī)臨床上未經(jīng)批準(zhǔn)使用，但也出現(xiàn)了較強(qiáng)的耐藥率（85.5%）；獸醫(yī)臨床上使用時(shí)間較短的氟苯尼考，在檢測(cè)中耐藥率達(dá)80.2%。 這表明了大腸桿菌對(duì)其適應(yīng)性產(chǎn)生速度之快，也提示獸醫(yī)臨床，抗菌藥物的選擇并非越新的藥物效果越好，而是制定合理、有效的抗菌藥物治療方案，降低細(xì)菌耐藥發(fā)生率。
　　3.2關(guān)于抗菌藥物的使用方法
　　上述3個(gè)雞場(chǎng)在生產(chǎn)中均存在一定程度的濫用藥物現(xiàn)象,用藥過(guò)程中的隨意性,用藥劑量和療程沒(méi)有按照獸醫(yī)的建議或說(shuō)明書(shū)；抗菌藥物的選擇上沒(méi)有考慮采取聯(lián)合用藥、交叉用藥、輪換用藥的方式，均是造成大腸桿菌存在廣泛的耐藥性的原因之一。
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