論文摘要:三種檢測方法在尿液有形成分分析中的差異探討
論文關鍵詞:檢測方法,尿液有形成分,分析,差異
隨著尿干化學分析儀和全自動尿沉渣分析儀的出現,使尿液常規分析實現了自動化,提高了尿液分析的效率和準確性。但尿液成分復雜,影響因素多,檢測結果與實際存在一定的差異,為了解全自動尿沉渣分析儀、尿干化學分析儀和顯微鏡檢查方法三者之間檢測結果的差異及影響因素,我們對1200份尿液標本進行了UF-100全自動尿沉渣分析儀和尿干化學分析儀檢測,并將結果與顯微鏡鏡檢作了比較。
1 材料和方法
1.1 儀器與試劑 日本UF-100全自動尿沉渣分析儀及配套試劑和質控液;Uritest-500B尿11聯干化學分析儀及配套試紙條和長春迪瑞質控液;顯微鏡;離心機。
1.2 標本來源 本院2010年3月1日至4月30日門診及住院患者尿液標本1200例,其中男618例,女582例,年齡6個月~80歲。
1.3 方法 用一次性無菌尿樣采集杯收集新鮮晨尿,每一個病人的尿液標本充分混勻后分三管,一管用于UF-100全自動尿沉渣分析儀,一管用于Uritest-500B尿11聯干化學分析儀。UF-100和Uritest-500B尿11聯干化學分析儀每天開機檢測前用各自質控液做質控試驗,嚴格按照操作說明進行每一份標本的檢測,并記錄實驗結果。第三管用于尿常規顯微鏡鏡檢,取10ml新鮮混勻尿于離心管,轉速3000r/min離心5min,棄上清尿液留約0.2ml尿沉渣液,混勻后鏡檢,實驗并記錄結果。全部操作遵照尿液沉渣檢查標準化的建議執行[1]。所有實驗2h內檢測完畢。
1.4 結果判斷標準 UF-100的RBC>20個/微升,WBC>25個/微升,管型大于2個/微升為陽性;Uritest-B500的RBC、WBC、蛋白質只要是+即為陽性;顯微鏡鏡檢:RBC≥3個/高倍鏡視野,WBC≥5個/高倍鏡視野,鏡下只要找到管型即為陽性。
2 結果
2.1 UF-100與顯微鏡鏡檢尿沉渣結果比較見表1。
以顯微鏡檢測RBC的陽性和陰性為真陽性和真陰性,UF-100和它作比較,UF-100全自動尿沉渣儀對RBC的檢出陽性符合率為83.96%、假陽性率為23.48%、假陰性率為16.04%;對WBC的檢出陽性符合率為88.35%、假陽性率為14.41%、假陰性率11.65%;對管型的檢出陽性符合率為80.64%,假陽性率為40.46%、假陰性率19.35%。
表1
項目
n
UF-100與
鏡檢均陽性
UF-100與
鏡檢均陰性
UF-100陽性
鏡檢陰性
UF-100陰性
鏡檢陽性
RBC
WBC
管型
1200
1200
1200
178
220
25
756
814
696
232
137
473
34
29
6
2.2 Uritest-500B尿11聯干化學分析儀與顯微鏡鏡檢尿沉渣結果比較見表2
以顯微鏡檢測WBC的陽性和陰性為真陽性和真陰性,優利特對RBC的檢出陽性符合率為90.07%、假陽性率為8.23%、假陰性率為9.92%,對WBC的檢出陽性符合率為88.59%、假陽性率為8.56%、假陰性率為11.41%,對管型的檢出陽性符合率為96.30%,假陽性率為14.75%、假陰性率3.70%。
表2
項目
n
Uritest-500B與
鏡檢均陽性
Uritest-500B與
鏡檢均陰性
Uritest-500B陽性
鏡檢陰性
Uritest-500B陰性
鏡檢陽性
RBC
WBC
管型
1200
1200
1200
227
233
26
870
854
1000
78
80
173
25
30
1
2.3 UF-100檢測尿標本假陽性結果影響因素見表3
232例RBC假陽性標本經鏡檢為結晶、酵母樣菌和細菌所致,所占RBC假陽性比例分別為52.16%、32.76%、15.09%。137例WBC假陽性標本經鏡檢分別為腎小管上皮細胞和細菌所致,所占WBC假陽性比例分別為83.94%、16.06%。473例管型假陽性標本經鏡檢為粘液絲、上皮細胞、菌絲所致,所占管型假陽性比例分別為72.09%、20.08%、7.82%。
表3
項目
影響因素
例數(%)
RBC(n=232)
WBC (n=137)
管型 (n=473)
結晶
酵母樣菌
細菌
腎小管上皮細胞
細菌
粘液絲
上皮細胞
菌絲
121(52.16)
76(32.76)
35(15.09)
115(83.94)
22(16.06)
341(72.09)
95(20.08)
37(7.82)
3 討論
UF-100全自動尿沉渣分析儀綜合應用了先進的流式細胞儀原理、電阻抗法及熒光染色技術,能夠全自動定量檢測非離心尿液中的紅細胞、白細胞、管型等有形成分,是目前國內外較先進的全自動尿沉渣分析儀[2] 。而尿干化學分析儀由于操作簡易、標本用量少、檢測速度快、結果準確也被越來越多的應用于臨床。所以三種方法檢測結果符合率高。但是由于三種方法的檢測原理不同,且尿液成份復雜,影響因素多,UF-100和Uritest-500B檢測尿RBC、WBC、管型與顯微鏡鏡檢的檢出符合率又不盡相同,從我們的實驗結果可以看出UF-100檢測RBC的假陽性率較高為23.48%,檢測管型的假陽性率則更高達40.46%。
UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測尿中紅細胞,當尿中有大量的酵母菌、細菌、結晶存在時,由于這些物質的熒光參數和紅細胞多有重疊,就會對紅細胞計數產生干擾而產生假陽性。所以其假陽性率高。在232例RBC假陽性標本中,經鏡檢發現有121例標本中含有大量草酸鈣結晶。這些結晶大小不等,部分與細胞形態相似,其染色的敏感性和細胞類似,在散點圖中與RBC交叉分布而干擾UF-100紅細胞計數[3]。另外有35例標本含大量細菌,76例標本含酵母樣菌,其前向散射光強度和RBC相似而將其誤認為RBC[4]。同樣,尿液中的上皮細胞和細菌團等熒光參數和白細胞有重疊,就會對白細胞計數產生干擾而產生假陽性。由于UF-100是檢測尿液中的形成分,當尿液中的RBC、WBC等遭破壞后,UF-100檢測結果就會出現假陰性。
而干化學法檢測RBC的原理是利用紅細胞內的血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶樣活性,可使有關色原呈色,檢測的是尿中的隱血,包括完整RBC和破壞的RBC. 用這兩種方法檢測尿中紅細胞,當尿干化學分析法檢測為陽性而UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測為陰性時,主要是因為尿中含有游離血紅蛋白或某些不耐熱的酶、肌紅蛋白等,如紅細胞處于不同滲透壓和pH環境中而造成的溶血。當尿干化學分析法檢測為陰性而UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測為陽性時,則主要是由于細菌、結晶和類酵母菌的干擾,其中以結晶干擾最為常見。而UF-100檢測WBC是利用中性粒細胞漿內的酯酶,水解試帶膜塊中含色原的酯類,釋放出的色原與重氮鹽反應形成呈色的縮合物,其顏色深淺與細胞的多少成比例。檢測的只是尿液中的中性粒細胞,而不包括淋巴細胞和單核細胞。用這兩種方法檢測尿中白細胞,當尿干化學分析法檢測為陰性而UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測為陽性時,其原因主要是因為尿中存在的白細胞為淋巴細胞或單核細胞。當尿干化學分析法檢測為陽性而UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測為陰性時,則可能是因為尿中的中性粒細胞受到破壞,而UF-100全自動尿沉渣分析儀只能對完整細胞的有形成分進行檢測,對破損的細胞不能檢測所造成,如尿液標本留取時間過長。
另外,UF-100檢測管型的假陽性率較高達40.46%,是由于在門診進行尿檢的患者大都有泌尿系統刺激癥狀而伴隨粘液絲的產生,尤其是有炎癥時,粘液絲和上皮細胞在尿液中的量增多,管型、粘液絲、上皮細胞的形態、大小、染色性有許多相似之處,導致儀器不能嚴格區分[5]而出現假陽性。
因此,雖然尿沉渣分析儀和干化學儀聯合檢測能互補不足,但尿液成分復雜,存在諸多影響因素,顯微鏡鏡檢更直觀,三者需聯合檢測,才能確保結果的準確性。
參考文獻
[1] 叢玉隆.尿液沉渣標準化的建議[J].中華檢驗醫學雜志,2002,25(4):249-250.
[2] 李焱鑫,鐘亞玲.UF-100尿沉渣分析儀不能取代鏡檢. 臨床檢驗雜志,2005,23(2):156.
[3] 武珍蓉,劉勝勇,徐麗珍,等。草酸鈣結晶對UF-100尿沉渣分析儀測定紅細胞的影響[J]。臨床檢驗雜志,2001,20(4):222-223
[4] 馬麗,袁漢堯,王小梅.酵母菌對UF-100尿沉渣分析儀紅細胞檢測結果的影響[J].上海醫學檢驗雜志,2001,16(3):161-162
[5] 馬政輝.UF-50全自動尿沉渣分析儀檢測項目假陽性結果的分析[J].臨床檢驗雜志,2002,22(1):67-68
上一篇:淺談職業教育項目課程的探索與開發